Tris hcl缓冲液配置
缓冲溶液是水基液体,包括弱酸及其共轭碱。由于其化学性质,即使发生化学变化,缓冲溶液也可以将pH(酸度)保持在几乎恒定的水平。缓冲液系统自然存在,但在化学上也非常有用。
缓冲溶液的用途
在有机系统中,天然缓冲溶液可将pH值保持在恒定水平,从而可能发生生化反应而不会损害有机体。当生物学家研究生物学过程时,他们必须保持相同的pH值。为此,他们使用了准备好的缓冲溶液。缓冲溶液的产品和概念于1966年首次被描述,今天我们使用的缓冲与许多年前的缓冲液是相同的。
为了有用,生物缓冲液必须满足多个标准。具体而言,它们应该是水溶性的,但不溶于有机溶剂。它们不应能够通过细胞膜。另外,在使用它们的所有实验中,它们必须是无毒,惰性且稳定的。
缓冲溶液天然存在于血浆中,这就是为什么血液在7.35和7.45之间保持一致的pH值的原因。 缓冲液还用于:
发酵过程
化学分析
pH计的校准
什么是Tris Buffer(Tris 缓冲液)?
Tris是三(羟甲基)氨基甲烷的缩写,该化合物由于等渗且无毒,因此常用于盐水中。 由于Tris的pKa为8.1,pH值在7至9之间,因此Tris缓冲溶液也常用于包括DNA提取在内的一系列化学分析和程序中。 重要的是要知道tris缓冲溶液中的pH确实会随着溶液温度的变化而变化。
如何准备Tris缓冲液
Tris常规缓冲液BIOFOUNT均有销售,但部分缓冲液自行配制可能更贴近实验本身。
配制Tris缓冲液需要的材料:
根据所需溶液的摩尔浓度和所需缓冲液的数量,计算所需各项的量。
三羟甲基氨基甲烷;
蒸馏去离子水;
盐酸。
配制Tris Hcl缓冲液的实验流程:
首先确定要制备的Tris缓冲液的浓度(摩尔浓度)和体积。例如,用于盐水的Tris缓冲溶液的范围从10到100 mM。一旦确定了所要制备的产品,就可以通过将缓冲液的摩尔浓度乘以制备的缓冲液的体积来计算所需的Tris摩尔数。 (Tris的摩尔= mol / L x L)
接下来,通过将摩尔数乘以Tris的分子量(121.14 g / mol)来确定这是多少克Tris。 Tris克=(摩尔)x(121.14 g / mol)
将Tris溶解在蒸馏去离子水中,为所需最终体积的1/3至1/2。
混入HCl(例如1M HCl),直到pH计为您所需要的Tris-hcl缓冲溶液的pH为止。
用水稀释缓冲液以达到所需的最终溶液体积。
Effect of concentration (a) Tris-HCl buffer pH 6.5 at dilution of urea injection concentration 0.001 M with potentiometer voltage 0.316 Volt, (b) Phosphat KH2PO4 buffer pH 7.5 at dilution of urea injection concentration 0.001 M with potentiometer voltage 0.321 Volt.